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高效液相色譜:檢測器的類型及性能評價

更新時間:2023-01-12 瀏覽次數:1669

        高效液相色譜儀中的檢測器是三大關鍵部件(高壓輸液泵、色譜柱、檢測器)之一,主要用于監測經色譜柱分離后的組分濃度的變化,并由記錄儀繪出譜圖來進行定性、定量分析。常用的檢測器有紫外吸收檢測器(UVD)、折光指數檢測器(RID)、電導檢測器(ECD)和熒光檢測器。



檢測器的分類

   

按檢測的對象分類

  (1)整體性質檢測器    檢測從色譜柱中流出的流動相總體物理性質的變化情況。如折光指數檢測器(RID)和電導檢測器(CD),它們分別測定柱后流出液總體的折射率和電導率。此類檢測器測定靈敏度低,必須用雙流路進行補償測量;易受溫度和流量波動的影響,造成較大的漂移和噪聲;不適合于痕量分析和梯度洗脫。


  (2) 溶質性質檢測器    此類檢測器只檢測柱后流出液中溶質的某物理或化學性質的變化。例如,紫外吸收檢測器(UVD)和熒光檢測器(FD),它們分別測量溶質對紫外光的吸收和溶質在紫外光照射下發射的熒光強度。此類檢測器靈敏度高,可單流路或雙流路補償測量,對流動相流量和溫度變化不敏感。但不能使用對紫外線有吸收的流動相。它們可用于痕量分析和梯度洗脫。


按適用性分類

   (1) 擇性檢測器    它對不同組成的物質響應差別極大,因此只能選擇性地檢測某些物質,如紫外吸收檢測器、熒光檢測器和電導檢測器。

  (2) 通用型檢測器  它對大多數物質的響應相差不大, 幾乎適用于所有物質。折光指數檢測器屬于通用型檢測器,但它的靈敏度低,受溫度影響波動大,使用時有一定局限性。

    上面提到的UVD,RID,FD,ECD 4種檢測器皆屬于非破壞性檢測器,樣品流出檢測器后可進行餾分收集,并可與其它檢測器串聯使用。對熒光檢測器因測定中加入熒光試劑,其對樣品會產生玷污,當串聯使用時應將它放在最后檢測。


檢測器的性能指標

   

     檢測器的性能指標見表2-2。


圖片


檢測器的性能評價

      在評價檢測器時,要強調以下幾點:

    (1) 噪聲   通常噪聲是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其它非溶質作用產生的高頻噪聲和基線的無規則波動高頻噪聲似“絨毛"使基線變寬;短周期噪聲是記錄器的基線變化,呈無規則的峰或谷。噪聲的存在會降低檢測靈敏度,嚴重時使儀器無法工作。


    (2) 基線漂移   漂移是基線的一種向上或向下的緩慢移動,可在較長時間(0.5~1.0 h)內觀察到。它可掩蔽噪聲和小峰。漂移與整個液相色譜系統有關,而不僅是由檢測器引起的。


   (3) 靈敏度(最小檢出濃度或最小檢出量)   在一個特定分離工作中,檢測器是否有足夠的靈敏度十分重要。當比較檢測器時,常使用敏感度這一性能指標。敏感度即指信號與噪聲的比值(信噪比)等于2時,在單位時間內進入檢測器的溶質的濃度或質量。

  (4)線性范圍     在進行定量分析時,希望檢測器有較寬的線性范以便在一次分析中可對主要組分和痕量組分同時進行檢測。

 (5)檢測器的池體積  它應小于最早流出的死時間色譜峰的洗脫體積的1/10,否則會產生嚴重的柱外譜帶擴展。



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